台湾海区斜带石斑鱼群体遗传学的等位酶研究

应用聚丙烯酰胺凝胶和淀粉凝胶技术对台湾海区斜带石斑鱼的遗传结构和遗传多样性水平进行了等位酶分析。对18种酶系统共27个等位酶基因座位的检测表明。ADH—l、ODH-2、FDH-1和Est-3等5个基因座位具多态性，其群体的多态位点百分率P为18．5％。有效等位基因平均数Ne为1．185，平均杂合度的观测值Ho为0．0469，预期值He为0．0662，反映了该群体的遗传多样性水平在鱼类中处于中等程度，而其Hardy-Weinberg遗传偏离指数(D)为-0．246，表明该群体仍存在着明显的杂合子缺失现象，相对于捕捞压力，海岸线的工程改造是对其资源的更主要威胁。     

斜带石斑鱼染色体核型分析

采用PHA、秋水仙碱腹腔注射，肾细胞直接制片法分析了斜带石斑鱼染色体核型。结果表明，斜带石斑鱼核型为：2n=48=2sm 46t,臂数：NF=50．     

斜带石斑鱼血液性状及生化指标的研究

研究了斜带石斑鱼血液性状及血液生化指标，并对其幼鱼与成鱼、雌鱼与雄鱼的血液性状及生化指标进行了比较分析．结果表明，与其它的硬骨鱼类相比，斜带石斑鱼的血液性状指标处于较低的水平；斜带石斑鱼幼鱼的血细胞比容及血细胞数量低于成鱼，幼鱼与成鱼在血液生化指标方面存在着显著差异；而雌雄差异不明显．结果可作为斜带石斑鱼的正常生理常数参考值。     

斜带石斑鱼人工育苗技术的初步研究

从广东引进斜带石斑鱼受精卵1.5kg(约2.2×106粒),孵出仔鱼约1.8×106尾,在水温25.0～28.8℃、盐度25.6～28.4、溶解氧5.7～7.3mg/L的条件下,使用海水小球藻、牡蛎受精卵和担轮幼虫、轮虫、卤虫无节幼体、蒙古裸腹溞、不同规格的微颗粒配合饲料和鱼糜进行饲喂,经72 d培育出平均全长44.1mm的幼鱼约3.05×104尾,育苗成活率达1.7%.     

福尔马林处理对石斑拟合片盘虫和斜带石斑鱼的影响

20 0 0年 4月研究了斜带石斑 Epinepheluscoioides寄生拟合片盘虫Pseudorhabdosynochusepinepheli的防治方法。海水福尔马林对拟合盘虫的作用表现为 :2 5min处理的半致死浓度为 2 5 0× 10 - 6 ,5 0min处理的半致死浓度为 5 0× 10 - 6 。淡水福尔马林的效果为 :3min的半致死浓度为 83× 10 - 6 ,纯淡水处理的半致死时间为 2 1min。海水福尔马林对斜带石斑的毒性表现为 :30min和 4 5min的半致死浓度分别为 94 0× 10 - 6 和 6 4 5× 10 - 6 。淡水福尔马林对斜带石斑的毒性表现为 :5min和 10min的半致死浓度分别为 130 0× 10 - 6 和 5 0 0× 10 - 6 。福尔马林处理海水中的斜带石斑半致死浓度介于 6 0 0× 10 - 6 ～ 10 0 0× 10 - 6 ,淡水处理对斜带石斑半致死浓度介于 95× 10 - 6 ～ 115×10 - 6 。淡水中斜带石斑的半麻醉和半致死时间分别为 95min和 115min。以上结果表明 :海水和淡水福尔马林对石斑拟合片盘虫的致死浓度 ,处于斜带石斑的安全范围之内。     

斜带石斑鱼转化生长因子β1（TGF β1）基因的克隆及表达分析

  转化生长因子β1（TGF β1）是一种高度保守的多效细胞因子。通过分子克隆得到了斜带石斑鱼Epinephelus coioidesTGF β1 cDNA全长序列,全长为2 477 bp,开放阅读框为1 161 bp,编码一种含386个氨基酸的多肽。Realtime PCR分析表明,TGF β1基因在健康斜带石斑鱼所取组织中均有表达,肾脏中表达最高,其次是头肾和脾脏。用PolyI:C或ConA刺激斜带石斑鱼头肾淋巴细胞,TGF β1表达量明显上升,且在刺激4 h后达到最高值。用PolyI:C刺激16、24 h后,TGF β1几乎不表达,而用ConA刺激实验组,TGF β1表达量一直高于对照组。结果说明,斜带石斑鱼TGF β1基因结构和表达特征与其他硬骨鱼类具有高度相似性。     

冰鲜杂鱼与颗粒饲料对斜带石斑鱼的对比饲养效果

选择冰鲜杂鱼和2个市场反映较好的石斑鱼配合饲料产品,分别对斜带石斑鱼（Epinephelus coioides）进行饲喂效果实验,通过生长性能、体成分、群体离散度以及养殖成本分析,评价冰鲜杂鱼和配合颗粒饲料在斜带石斑鱼养殖效果上的优劣。同一批培育的斜带石斑鱼幼鱼,随机分成3组（冰鲜杂鱼组、石斑鱼颗粒饲料1组和石斑鱼颗粒饲料2组）,每组3个网箱,每箱45尾。养殖实验为期7周,每天定时定点投喂两次。结果表明:冰鲜杂鱼组的增重率、特定生长率、摄食率均显著高于两种颗粒饲料组;群体离散度则是冰鲜杂鱼组大于颗粒饲料组;冰鲜杂鱼组粗蛋白含量显著高于两种颗粒饲料组,但是粗脂肪含量显著低于颗粒饲料组;斜带石斑鱼每增重1 kg所需的饲料成本,饲喂冰鲜杂鱼要比饲喂两种颗粒饲料分别高3.25和4.26元,性价比较低。这些说明:冰鲜杂鱼在促进斜带石斑鱼生长和鱼体蛋白沉积方面虽然优于配合饲料,但在性价比、便捷性以及鱼体规格一致性上,冰鲜杂鱼则不如配合饲料。     

温度和盐度对斜带石斑鱼幼鱼生长与存活的影响

研究了水温及盐度渐变和突变条件下斜带石斑鱼幼鱼的生长和存活情况.结果表明:1)斜带石斑鱼幼鱼在温度15～32 ℃的海水中均能存活和生长,最适温度范围为22～28 ℃.在突变条件下,斜带石斑鱼幼鱼在温度为14～32 ℃范围内48 h的存活率均在92.5 %以上,其中17～29 ℃的存活率为100 %;在渐变条件下,温度为12～32 ℃范围内幼鱼存活率可达80 %～95 %.2)斜带石斑鱼幼鱼的盐度适宜范围是9～39.在突变条件下,斜带石斑鱼幼鱼在盐度为4～39范围内48 h的存活率均在95 %以上,盐度为0时不能存活;在渐变条件下,盐度为4～39范围内幼鱼存活率可达91 %～100 %,其中盐度为14～39范围内幼鱼的存活率均在98 %以上.     

石斑鱼卵巢cDNA文库构建及脂肪酸结合蛋白克隆

应用SMARPTM技术构建了斜带石斑鱼Epinephelus coioides卵巢cDNA文库。所构建的cDNA文库滴度为4.5×106 pfu/mL,重组率为99％,扩增后文库的滴度为1.2×1010pfu/mL。把phagemid转化为质粒后,随机挑选60个阳性克隆进行酶切鉴定和测序。酶切结果表明:插入片段长度均在500~3 000 bp之间。测序结果经过生物信息学分析,发现其中一个克隆为脂肪酸结合蛋白(FABP)基因全长,并与人肝型(L)脂肪酸结合蛋白同源性最高,为70％。     

甲状腺素和生长激素与斜带石斑鱼早期个体发育的关系

采用放射免疫法测定了斜带石斑鱼卵、胚胎及仔鱼组织的三碘甲腺原氨酸(T3)水平。斜带石斑鱼未受精卵中含有较高的T3水平，达每克体质量2，75ng，于开口期升至每克体质量6.28ng，之后保持在较低水平。用T3浸泡处理4～5周仔鱼，当T3浓度达到10^-8mol／L以上时，外源T3才能引起组织T3水平增加；10^-8mol/L的作用比10^-7mol/L的作用弱，浸泡24h所引起的T3增加幅度明显高于72h；对4周仔鱼的影响明显强于5周仔鱼。这些结果证实了斜带石斑鱼卵中存在母源T3，其自身内分泌腺的分化可能始于孵化期或开口期，处于变态后期的仔鱼已具有一定的调节组织甲状腺素水平的能力。外源T3能影响4--5周仔鱼组织L水平的最低浓度为10^-8mol／L,浸泡2，4h对发育早期的仔鱼作用较强。用RT-PCR检测了斜带石斑鱼卵、胚胎及仔鱼生长激素(growth hormone，GH)mRNA的表达情况，表明未受精卵中有较高水平的GH mRNA表达，受精卵至囊胚期胚胎的GH mRNA表达水平较低，原肠期以后，胚胎GH mRNA的表达量明显增加，进一步证明硬骨鱼从受精卵开始就存在GH mRNA的表达，并在自身内分泌腺分化之前参与鱼类早期发育的调节。总之，斜带石斑鱼的早期发育受甲状腺素和生长激素的共同调节。